WB蛋白分析產品組合方案

 

繼上期的《WB干貨丨返校后你必須要知道的WB樣本前處理產品組合方案》之后,知道小伙伴們想知道樣本前處理之后的操作說明的迫切需求。小編在這里也收到了Abbkine忠實的新老客戶對Abbkine產品的熱切渴望。于是,WB干貨系列之二:返校后你必須知道的WB轉膜后的產品組合方案,應運而生,為大家繼續解疑答惑。

 

上一期,給大家講到了蛋白定量產品,大家可能會好奇,到底蛋白定量產品應該如何選擇合適的呢?接下來為大家揭曉:

 

蛋白定量

蛋白定量目前最受歡迎的要數BCA法和Bradford法了:

 

BCA法:可耐受去污劑:SDS、TritonX-100,Tween-20等,但不耐還原劑,若樣本含有去污劑不含還原劑,可使用該法(推薦KTD3001

Bradford法:可耐受耐受大部分樣品中的化學物質,不耐高濃度去污劑,若樣本含有高濃度的去污劑,可使用該法(推薦KTD3002

 

蛋白定量之后,做蛋白分析自然是廣大WB實驗者最關心的問題了。

 

第一步是上樣了,上樣過程中,除了大家不能忘記的樣本順序之外,然后最重要的要數蛋白Marker了,為了能清楚地指示蛋白分子量大小,有的資深WB操作者會選擇點2-3個預染蛋白孔,避免實驗的不確定性,提高指示的清晰度。這里為大家推薦兩款彩色預染蛋白marker

 

彩色預染蛋白marker

BMM3001 BMM3002

 

從實驗效果圖來看,BMM3001 和BMM3002 marker的色彩非常鮮明清晰度,對比度是非常高的。指示結果的參考價值都是非常高的。

 

經過緊張漫長的跑膠轉膜步驟之后,終于進入了WB的免疫步驟階段。這時如何正確的選擇內參抗體,將成為WB實驗輔助的重要步驟,下面干貨又來了——正確內參選擇的三大法寶:

 

1. 樣本種屬來源:哺乳動物的組織或者細胞樣本,通常選擇β-actin、β-tubulin、GAPDH等,植物實驗樣本選用plant actin、Rubisco等

2. 蛋白分子量:應該考慮目的蛋白分子量的大小。通常應該保證目的蛋白與內參蛋白分子量相差5KD以上;對于超過100 kDa的高分子量蛋白,推薦使用Vinculin粘著斑蛋白作為內參抗體。

3. 蛋白表達部位:根據蛋白表達位置的不同可以選擇更加合適的抗體。常用的廣泛性的β-actin、β-tubulin、GAPDH;檢測細胞核Lamin A、Histone H3、PCNA,檢測細胞膜Na,K ATPase等等。

 

Abbkine的內參抗體除了游離抗體外還有經過標記物偶聯的直標抗體。如果您覺得還不夠,那么還可以與我們Abbkine的技術專家(support@abbkine.com)聯系,深入溝通,他會幫您找到與您的實驗最合適的內參抗體。

 

內參抗體

 

除了內參抗體之外,靶蛋白抗體的選取才是我們WB實驗的點睛之筆,說到這里您可能會考慮:如何才能選到特異性強,靈敏度高,文獻支持多的抗體呢?首選就是Abbkine的臻品一抗了,一聽這個名字就知道,我們這個抗體是經過Abbkine科學家對抗體功能性質進行千錘百煉的。所以用過的客戶都贊不絕口。不信?你也可以試試。

 

當然,Abbkine的普通單抗和多抗也是效果良好,性價比極高的。用過的童鞋都說好。如果客戶的樣本是帶有蛋白標簽的重組蛋白,檢測我們也能提供對應的標簽抗體及其直標抗體,滿足多種實驗需求的客戶。

 

貨號 名稱
A02010 Anti-DDDDK Tag Mouse Monoclonal Antibody (1B10)
A02020 Anti-GFP Tag Mouse Monoclonal Antibody (3D3)
A02030 Anti-GST Tag Mouse Monoclonal Antibody (2A8)
A02040 Anti-HA Tag Mouse Monoclonal Antibody (4F6)
A02050 Anti-His Tag Mouse Monoclonal Antibody (5C3)
A02060 Anti-Myc Tag Mouse Monoclonal Antibody (2D5)

 

當然也有許多客戶對Abbkine自主研發的偶聯試劑盒感興趣,我們公司也有給大家精心打造的LIKINE系列的試劑盒,自己偶聯的抗體,用起來也會很有成就感。

 

LIKINE系列的試劑盒

 

實驗的最后,當然是顯色液的使用了,Abbkine的ECL顯色液可達到皮克級別和飛克級別。這個靈敏度是非??捎^的。SuperLumia高敏以及超敏ECL產品具有極高的靈敏度, 對樣品和抗體的需求量更低;發光信號強烈且持續時間長。

 

貨號 名稱
K22020 SuperLumia ECL HRP Substrate Kit
K22030 SuperLumia ECL Plus HRP Substrate Kit

 

Abbkine的技術專家為了給廣大讀者提供學習生物知識的平臺,經過不懈努力,將多種高端生物實驗的干貨整理出來,后期陸續在微信公眾號中刊登,請廣大熱愛科學的讀者持續關注Abbkine公眾號。

 

Abbkine專注于蛋白學和細胞學領域,致力于創新和研發各類抗體、蛋白質、分析試劑與試劑盒,以期成為生命科學研究發展、藥物研發等領域的關鍵推動者。我們為您提供蛋白和免疫研究用戶最喜愛的產品,從免疫學基礎產品,如蛋白提取定量,到免疫學實驗的內參標簽抗體、一抗及二抗等;細胞研究用戶最喜愛的產品,從用于檢測細胞狀態的染料及試劑盒,細胞器提取試劑盒,細胞亞結構染色示蹤及細胞代謝檢測產品,到用于細胞培養的細胞因子及蛋白類檢測試劑盒,只為助力您的研究事業!

 

關于Abbkine

我們的定位:服務于細胞和蛋白研究全球用戶,以應用流程和產品組合的方式為用戶提供經濟型和技術型的產品解決方案。

我們的使命:激發我們內在的創造力,提供有競爭力的生物醫學產品和服務,持續為客戶創造最大價值。

我們的愿景:成為受人尊重、世界一流的生物醫學產品及服務供應商。

 

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