探索SUMOstar技術,SUMOstar表達和純化系統的優勢

背景:

在細胞內,蛋白質通過泛素標記定位于26S蛋白酶體進行降解,而細胞蛋白質則受到類似泛素的修飾物SUMO(小泛素樣修飾物)的共價修飾調節,影響著核運輸、信號傳導和蛋白穩定性等細胞過程。泛素類蛋白主要包括SUMO、Rub1(又稱Nedd8)、Apg8和Apg12,以及泛素結構域蛋白(UDPs)如parkin、RAD23和DSK2,它們具有泛素相關但獨立的結構域,不發生共價連接。SUMO化在真核系統中廣泛存在,保守性高,促進蛋白-蛋白和蛋白-DNA相互作用,以及靶標蛋白的定位和穩定性。酵母SUMO(Smt3)與目標蛋白融合可顯著增強表達并促進正確溶解與折疊。

SUMOstar作為不可切割的SUMO形式,主要服務于真核系統,而其細菌版本則用于初期測試并后續轉為真核系統載體。泛素和SUMO的共價連接提高融合蛋白的產量與溶解度,而將高穩定性泛素或SUMO附加到合作蛋白可提升重組融合蛋白的生成量??傮w而言,泛素和類泛素結構域的融合可增強溶解度,其折疊結構的不同性質使其對低溶解度的合作蛋白具有類似洗滌劑效果。

泛素融合長期以來用于增強蛋白表達,但其在蛋白純化方面受泛素水解酶或其它蛋白酶的低效問題困擾,因此需要更高效的蛋白酶如Ulp1來解除融合蛋白與泛素的連接。最近,SUMO蛋白酶Ulp1被認為是一種優秀的純化工具,特別適用于大腸桿菌表達的重組SUMO融合蛋白。相比其他蛋白酶,Ulp1表現更出色,識別Smt3結構并裂解連接,不受N-末端序列影響(除脯氨酸外),且不在蛋白內部裂解?;赨LP1平臺,LifeSensors公司研發了一種特異的SUMOstar蛋白酶,示有顯著潛力。

 

SUMOstar表達和純化系統的優勢:

1)SUMOstar融合可以顯著增強重組蛋白表達。

2)SUMOstar融合可以增強溶解度。

3)未知有SUMOstar蛋白酶在融合的感興趣蛋白內部裂解的情況。

4)SUMOstar蛋白酶裂解和隨后的純化可產生具有期望N-末端的原生蛋白。

 

艾美捷作為LifeSensors在中國的區域獨家代理,為您推薦Lifesensors品牌的SUMOstar系列產品,助你發表多篇高分文章。

產品名稱 貨號 說明
SUMOstar Protease SP4110 SUMOstar 蛋白酶
SUMOstar Protease Control Protein SP-5010-0100 重組蛋白

 

SUMOstar Protease產品信息

純度:SDS-PAGE和RP-HPLC檢測純度>95%

分子量:26,481.3Da

特異活性:1 U可在37攝氏度1小時內裂解>90 μg SUMOstar-GFP

物理狀態:液態,濃度10U/μL

數量:500、1000、5000或10,000單位

儲存:-80攝氏度。避免反復凍融循環

 

LifeSensors成立于1996年,位于美國賓夕法尼亞州費城,是一家為藥物發現與研究提供方法和可行性技術方法的生物技術公司,目前主要的產品有400多種,其產品主要覆蓋泛素和泛素蛋白酶體通路等科學應用領域,并且公司擁有兩大獨家技術平臺:用于細胞信號和藥物發現的泛素蛋白酶體系統(UPS),以及增強目的蛋白在大腸桿菌、酵母、昆蟲和哺乳動物細胞中表達與純化的SUMO融合表達系統,此外,LifeSensors還為泛素的蛋白質組學提供眾多定制技術服務,并且已經開發了各種各樣的測定細胞中的生理底物或生物標志物的方法。

 

艾美捷作為LifeSensors在中國的區域獨家代理,艾美捷科技有限公司將為中國客戶提供全面的LifeSensors的產品。

 

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