一個Norgen試劑盒輕松搞定:總蛋白濃縮,去污劑和內毒素去除

 

蛋白質濃縮技術屬于生物大分子的濃縮技術,目的是利用物理或化學的方法,除去蛋白質溶液中的水分、離子和其它小分子物質,使單位體積內的蛋白質濃度大幅度提高。蛋白質樣品經過一系列的分離提取和層析會導致樣品的稀釋,而許多分析和研究都需要高濃度或高純度的樣品,所以蛋白質樣品的濃縮至關重要。蛋白質濃縮技術主要有透析袋濃縮法、冷凍干燥濃縮法、吹干濃縮法、超濾膜濃縮法、凝膠濃縮法等。

 

蛋白質濃縮技術

 

去污劑是兩性分子,其長親脂性烴基(尾部)末端連有極性或帶電荷的親水基團(頭部)。它們能夠降低水的表面張力,因此也被稱為表面活性劑。去污劑被廣泛用于生物化學、細胞生物學和分子生物學研究。常見的應用包括細胞裂解、膜蛋白和脂質溶解、蛋白質結晶以及減少印跡實驗的背景染色。

 

去污劑

 

內毒素是革蘭氏陰性細菌細胞壁中的一種成分,叫做脂多糖。脂多糖對宿主是有毒性的。內毒素只有當細菌死亡溶解或用人工方法破壞菌細胞后才釋放出來,所以叫做內毒素。內毒素不是蛋白質,因此非常耐熱。在100℃的高溫下加熱1小時也不會被破壞,只有在160℃的溫度下加熱2到4個小時,或用強堿、強酸或強氧化劑加溫煮沸30分鐘才能破壞它的生物活性。內毒素脂多糖分子由菌體特異性多糖、非特異性核心多糖和脂質A三部分構成。脂質A是內毒素的主要毒性組分。不同革蘭氏陰性細菌的脂質A結構基本相似。因此,凡是由革蘭氏陰性菌引起的感染,雖菌種不一,其內毒素導致的毒性效應大致類同。

 

內毒素

 

如何濃縮總蛋白,以及去除蛋白中的去污劑和內毒素?艾美捷科技作為專業的生命科學領域解決方案供應商,為您推薦獨代品牌Norgen Biotek總蛋白濃縮,去污劑和內毒素去除試劑盒。

 

Norgen Biotek總蛋白濃縮試劑盒

產品名稱及描述 貨號 規格 最大上樣量 洗脫體積
ProteoSpin™ Total Protein Concentration, Detergent Clean-Up and Endotoxin Removal Mini Kit 22800 25次 200 μg 50 μL
ProteoSpin™ Total Protein Concentration, Detergent Clean-Up and Endotoxin Removal Maxi Kit 22200 4次 4 mg 2-4 mL

 

ProteoSpin™總蛋白濃縮,去污劑和內毒素去除試劑盒可以高效去除實驗室常用的多種鹽,包括MgCl2,NaCl,KCl,CaCl2,LiCl和CsCl等。在濃縮蛋白溶液的同時進行鹽的去除,使該試劑盒成為在進行許多下游應用(如SDS-PAGE,等電聚焦,X射線晶體學,核磁共振光譜,質譜和其它應用)之前制備蛋白的便捷方法。

 

ProteoSpin™總蛋白濃縮,去污劑和內毒素去除試劑盒設計用于從先前提取的蛋白或多肽中快速去除內毒素,實現了95%以上的蛋白回收率。內毒素,也稱為脂多糖,是革蘭氏陰性細菌如大腸桿菌的細胞膜成分。革蘭氏陰性細菌釋放的內毒素是生物過程中的產生的蛋白質溶液的常見污染。由于內毒素在體內和體外都具有很高的毒性,因此,在將蛋白質用于下游應用之前,通常必須將其從蛋白制劑中除去。該試劑盒使用基于Norgen專利樹脂的旋轉柱色譜法作為分離基質,可有效地將內毒素水平降低至≤0.01 EU/μg。純化的蛋白質樣品可用于多種下游應用,包括測序,克隆,以及在體內和體外的細胞和生物中的引用。

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總蛋白濃縮,去污劑和內毒素去除試劑盒特點與優勢:

  1. 內毒素流過時,色譜柱結合目標蛋白質;
  2. 將內毒素水平降低到小于1 EU / μg;
  3. 蛋白質回收率超過95%;
  4. 濃縮蛋白質樣品并同時去除去污劑,鹽和內毒素;
  5. 有效去除各種去污劑,包括SDS,Triton?X-100,CHAPS,NP-40和Tween 20。

 

總蛋白濃縮,去污劑和內毒素去除試劑盒,廠家測試:

 

總蛋白濃縮,去污劑和內毒素去除試劑盒 處理前后內毒素水平
總蛋白濃縮,去污劑和內毒素去除試劑盒 蛋白回收率高
總蛋白濃縮,去污劑和內毒素去除試劑盒 從樣本裂解物中有效去除SDS
總蛋白濃縮,去污劑和內毒素去除試劑盒 蛋白質高回收率和高除鹽率

 

產品引用精彩文章鑒賞

  1. Social learning and amygdala disruptions in Nf1 mice are rescued by blocking p21-activated kinase.Nature Neuroscience.2014.
  2. The Toll-like receptor 5 ligand flagellin promotes asthma by priming allergic responses to indoor allergens.Nature Medicine.2012.

 

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