線粒體是細胞的動力來源,影響細胞穩態、增殖、死亡的關鍵信號通路。由于線粒體的動態行為和與其他細胞器的豐富相互作用,熒光顯微鏡的發展特別推動了線粒體研究線粒體。線粒體內膜 (inner membrane, IM)向內凹陷形成許多層狀或管狀的內嵴,其間距通常小于100 nm,導致傳統熒光顯微鏡無法觀察到其內部精細結構。因此,基于固定樣本的電子顯微鏡技術一直作為捕捉線粒體膜結構的主流工具。近年來,活細胞線粒體納米成像已從原理驗證發展成為一種結構和功能研究的可行方法。其中,受激發射損耗納米顯微鏡(STED)和結構光照明顯微鏡(SIM)已被報道用于活細胞的內嵴成像。然而,目前線粒體納米結構的可視化大多局限于癌細胞的二維(2D)單色成像,正交策略尚未建立,且STED圖像采集會受到細胞器的光損傷或快速光漂白的影響,很難觀察到原生狀態下的線粒體形態。
為解決上述痛點,今天為大家帶來艾美捷代理的浦海景珊生物技術有限公司(Genvivo)的PK Mito線粒體探針,這款劃時代的探針是基于北京大學陳知行團隊于2020年發表于英國皇家化學會旗艦期刊Chemical Science的學術成果的轉化,德國馬普所的Stefan W. Hell教授(2014年諾貝爾化學獎得主)特別點贊PK Mito使用效果,他強調:“PK Mito高度還原了線粒體精細動態的細節?!?/b>
PK Mito能夠特異性結合到各類細胞的線粒體上,與傳統染料相比,PKMITO?系列線粒體染料能夠實現超分辨率成像,使細胞輪廓更清楚,同時光毒性大幅度降低,能夠在成像時最大程度保持線粒體狀態,最大程度減少對生物細胞生理反應的影響,是絕佳的超分辨及長時程線粒體成像染料。
目前PKMITO?系列主要供應3款不同顏色的探針:
產品名稱 | 貨號 | 包裝 | 適用范圍 | 保存條件 | 保質期 |
PK?Mito?Red | PKMR-1 | 25nmol | 熒光顯微鏡、Confocal、SIM | -20℃,避光 | 1年 |
PK?Mito?Orange | PKMO-1 | 25nmol | 熒光顯微鏡、Confocal、SIM、STED | ||
PK?Mito?Deep?Red | PKMDR-1 | 25nmol | 熒光顯微鏡、Confocal、SIM |
1.PK MitoRed(貨號:PKMR-1)成像結果賞析
PK Mito?Red vs Mito Tracker:
PK Mito Red與Mito Tracker成像結果對比,我們可以看到,隨著成像時間的增加,Mito Tracker染色的線粒體發生明顯變形,38s后成像消失,而PK Mito染色的線粒體可以明顯看到線粒體內嵴且成像沒有明顯變化~
2.PK Mito Orange(貨號:PKMO-1)成像結果賞析
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3.PK Mito Orange(貨號:PKMDR-1)成像結果賞析
Hessian-SIM 超分辨成像中PK Mito Red和商業探針MitoTracker Red的光毒性對比
引文賞析:
- Yang, Zhongtian, et al. "Cyclooctatetraene-conjugated cyanine mitochondrial probes minimize phototoxicity in fluorescence and nanoscopic imaging." Chemical Science(2020).
- Liu, Tianyan, et al. "Multi-color live-cell STED nanoscopy of mitochondria with a gentle inner membrane stain." Proceedings of the National Academy of Sciences119.52 (2022): e2215799119.
PNAS封面文章 |
PKMito標記的HeLa細胞線粒體內嵴,微絲蛋白(SPY650FastAct),和細胞核(SPY505 DNA)的多色活細胞成像圖 |
線粒體內嵴與mtDNA、線粒體外膜,crista junction,內質網、細胞骨架的多色STED成像 |
浦海景珊生物技術有限公司(Genvivo Biotech)是一家提供高端成像試劑的公司,Genvivo的目標是開發一系列適應于超分辨成像的染料技術。PKMITO™系列線粒體染料,Gen Fluor™系列熒光染料及抗體是他們最先推出的適應于超分辨熒光成像產品。目前他們正在繼續深耕新一代產品研發,旨在為科研用戶和企業用戶提供極致的成像體驗。其開發的拳頭產品PKMITO™系列線粒體染料是基于北京大學學術成果轉化,是市面上持續時間最長,細胞毒性最小的超分辨率的線粒體探針。
作為Genvivo在中國區域的代理,艾美捷科技有限公司將為中國客戶提供最全面的Genvivo的產品及服務。