前情回顧：PK Mito——諾獎學者點贊&PNAS封面文章的超分辨線粒體探針
鑒于可用的固定探針有限，對線粒體超微結構進行超分辨率激發發射耗盡(STED)成像主要使用活細胞。為了解決這個問題，研究人員通過一種新興的生物偶聯策略，成功開發了一種名為PK Mito Orange FX (PKMO FX)的可醛固定線粒體探針。這種探針具有光學優勢，能夠在固定前后保持強熒光信號，實現了納米級STED成像。這一突破將有助于推動線粒體研究的超分辨率成像技術的普及化，為更廣泛的科研和應用提供了強有力的工具。PK Mito Orange FX的開發標志著在線粒體研究領域取得了重要進展，并為相關領域的深入探索和發現打開了新的可能性。
化學固定標本的熒光標記技術，尤其是免疫標記技術，在超分辨率成像中發揮著至關重要的作用，它為線粒體等細胞結構或生物分子的分布提供了一種方便、精細的方法。
盡管各個供應商開發了各種不同的探針，可以對活細胞中的線粒體進行超分辨受激發射耗盡(STED)成像，但大多數這些膜電位依賴性熒光團在化學固定后不能很好地保留在線粒體中。缺乏合適的線粒體探針限制了線粒體對活細胞樣本的STED成像。 Genvivo引入了一種線粒體特異性探針PK Mito Orange FX (PKMO FX)，它具有固定驅動的交聯基序，并在線粒體內膜中積累。它在化學固定后具有高熒光保留率，在775 nm處有效耗盡，可以在醛固定前后進行納米級成像。
目前Genvivo證明了該探針與常規免疫標記和其他常用的固定樣品熒光標記策略的兼容性。此外，我們發現PKMO FX促進了相關的超分辨率光學和電子顯微鏡，使多色熒光圖像和透射電鏡圖像通過線粒體模式的相關性。我們的探針進一步擴展了線粒體工具包，用于納米分辨率的多模態顯微鏡。
成像結果賞析：
目前PKMITO?系列主要供應3款不同顏色的探針：
| 產品名稱 | 貨號 | 包裝 | 適用范圍 | 保存條件 |
| PK?Mito?Red | PKMR-1 | 25nmol | 熒光顯微鏡、Confocal、SIM | -20℃，避光 |
| PK?Mito?Orange | PKMO-1 | 25nmol | 熒光顯微鏡、Confocal、SIM、STED | |
| PK?Mito?Deep?Red | PKMDR-1 | 25nmol | 熒光顯微鏡、Confocal、SIM | |
| PK Mito Orange Fix | PKMOF | 10次/50次 | 熒光顯微鏡、Confocal、SIM、STED | -20℃，避光 |
參考文獻：
1、Chen, Jingting, et al. "An aldehyde-crosslinking mitochondrial probe for STED imaging in fixed cells." Proceedings of the National Academy of Sciences 121.19 (2024): e2317703121.
