如何快速測定NAD/NADH,NADP/NADPH,ATP/ADP的含量及其比值

輔因子(Cofactor)是一類可以和蛋白質結合并使蛋白質行使正常催化作用的非蛋白質類化合物,主要包括NAD+/NADH、NADP+/NADPH、ATP/ADP等。

NAD+(煙酸腺嘌呤二核苷酸)和NADH(還原型煙酸腺嘌呤二核苷酸)是細胞內常見的輔酶對。NAD+是一種氧化劑,而NADH是其還原形式,可以在許多生物化學反應中作為電子和氫離子的載體。NAD+/NADH在細胞的能量代謝、呼吸鏈和許多氧化還原反應中起重要作用。

NADP+(煙酸腺嘌呤二核苷酸磷酸鹽)和NADPH(還原型煙酸腺嘌呤二核苷酸磷酸鹽)也是一對輔酶。與NAD+/NADH類似,NADP+是一種氧化劑,而NADPH是其還原形式。NADP+/NADPH在許多生物化學反應中起著重要的電子傳遞和還原作用,尤其在生物合成過程中扮演著重要角色。

ATP(腺苷三磷酸)和ADP(腺苷二磷酸)是細胞內的重要能量分子。ATP是細胞內能量的主要儲存形式,當細胞需要能量時,ATP會通過水解反應釋放出磷酸根,轉化為ADP,同時釋放出能量。ADP可以通過其他代謝途徑再次合成ATP,形成一個能量循環。ATP/ADP在細胞的能量代謝、信號傳遞和許多生物化學反應中起著關鍵作用。

1.?NAD、NADH

NAD、NADH.png

 

煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(nicotinamide adenine dinucleotide,簡稱NAD ),由五碳糖,含氮堿基,磷酸基團形成,因為是由兩個核苷酸形成的,所以叫做二核苷酸,它是一種轉遞電子的輔酶,出現在細胞很多新陳代謝反應中,NADH是它的還原形式。 NADH與NAD是細胞中的一對氧化還原對,NADH作為氫和電子的供體,NAD作為氫和電子的受體,參與呼吸作用、光合作用、酒精代謝等生理過程。它們作為生物體內很多氧化還原反應的輔酶參與生命活動,并相互轉化。因此,監測其濃度水平一直是人們關注的焦點。NAD/NADH的定量測定在細胞或組織的能量轉化和氧化還原狀態的研究中具有重要應用價值。

 

貨號 BA0067 BA0106
名稱 NAD/NADH Assay Kit NAD/NADH Assay Kit
方法 比色法(OD565nm) 熒光法(λex/em = 530/585 nm)
用途 測定NAD, NADH的含量及其比值 測定NAD, NADH的含量及其比值
檢測限 0.05uM 0.02uM
樣本 細胞或組織提取物 細胞或組織提取物

 

2.?NADP、NADPH

NADP、NADPH.png

 

煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(nicotinamide adenine?dinucleotidephosphate,簡稱NADP)與NAD的不同之處只在于其分子有一個額外的磷酸基,NADPH是它的還原形式。NADP+參與生物合成反應,如脂質和核酸的合成。在動物細胞中,戊糖磷酸途徑的氧化階段是NADPH的最重要來源。NADP/NADPH的定量測定在細胞或組織的能量轉化和氧化還原狀態的研究中具有重要應用價值。

 

貨號 MAES0200 BA0107
名稱 NADP+/NADPH Assay Kit NADP/NADPH Assay Kit
方法 比色法(OD450nm) 熒光法(λex/em=530/585 nm)
用途 測定NADP、NADPH含量及其比值 測定NADP、NADPH含量及其比值
檢測限 0.02 ?mol/L 0.01 uM
樣本 細胞或組織提取物 細胞或組織提取物

 

3.?ATP、ADP

ATP、ADP.png

 

三磷酸腺苷(Adenosine triphosphate,簡稱ATP)為一種輔酶,有改善機體代謝的作用,參與體內脂肪、蛋白質、糖、核酸以及核苷酸的代謝。同時又是體內能量的主要來源,當體內吸收、分泌、肌肉收縮及進行生化合成反應等需要能量時,三磷腺苷即分解成二磷酸腺苷(ADP)及磷酸基。通過ADP/ATP比例的變化可以區分細胞死亡和存活狀態。ATP水平的增加和ADP水平的降低表示細胞增殖。相反,ATP水平的降低和ADP水平的增加表示凋亡或壞死細胞,其中在壞死中ATP的降低和ADP的增加比凋亡更為顯著。

 

貨號 BA0127
名稱 ADP/ATP Ratio Assay Kit
方法 化學發光
樣本 細胞
用途 測定ADP/ATP比值
應用 細胞凋亡和壞死的測定。

細胞增殖:細胞因子、生長因子、營養物質的作用。

藥物發現:抗癌藥物的高通量篩選

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