雙鏈RNA(dsRNA)是通過體外轉錄產生的治療性mRNA的主要雜質。需要在mRNA生產批次中嚴格監測該轉錄副產物的雜質水平,以確保有效的mRNA表達并降低不期望的高免疫原性風險。
使用SCICONS使用平行運行的dsRNA對照,可估計dsRNA雜質的量
圖1:使用SCICONS
A)將等量(1 μg)的Poly(A)ssRNA(陰性對照)和dsRNA 142 bp(陽性對照)沿著與dsRNA 142 bpbp的4倍稀釋系列一起進行印跡,隨后用SCICONS
B)使用SCICONS通過變性瓊脂糖凝膠電泳確認mRNA完整性。
ARCA:抗反向帽類似物,MT:甲基轉移酶,AnP:南極磷酸酶,NTA:假尿苷,Me 1 NTA:N1-甲基假尿苷,5 moU:5-甲氧基尿苷,5 meC:5-甲基胞苷。
雙鏈(ds)RNA形成是病毒感染的標志,其對于誘導先天免疫是必不可少的。dsRNA也參與基因沉默,并在基于體外轉錄的RNA合成期間作為副產物產生??筪sRNA單克隆抗體是檢測細胞培養組織(如FFPE樣品)以及體外轉錄(m)RNA制備物中dsRNA的有效工具。
- 用于表征檢測具有dsRNA基因組或中間體的病毒(包括SARS、丙型肝炎、登革熱或西尼羅河病毒)。
- 作為確定未知病原體是病毒還是細菌來源的診斷工具。
- 用于體外轉錄(m)RNA制備的質量控制。
可用dsRNA檢測產品概述
產品 | 描述 | 選擇指南 |
---|---|---|
抗dsRNA單克隆抗體J2 | 小鼠,IgG2a,κ輕鏈 | dsRNA檢測的金標準 推薦用于體外轉錄(m)RNA的質量控制 |
抗dsRNA單克隆抗體J5 | 小鼠,IgG2b,κ輕鏈 | 具有相似親和力和特異性的J2的同位素替代物。 推薦用于在免疫熒光顯微鏡中同時檢測dsRNA和其他標記物 |
抗dsRNA單克隆抗體K1 | 小鼠,IgG2a,κ輕鏈 | 推薦用于Poly I:C檢測 J2交叉反應情況下的替代品 |
抗dsRNA比較集 | J2、J5和K1抗體大小的樣本 | 推薦用于J2、J5和K1抗體的比較試驗 |
抗dsRNA單克隆抗體K2 | 小鼠,IgM,κ輕鏈 | J2 K1的替代同種型& 推薦用于(夾心-)ELISA |
dsRNA 142 bp | 合成dsRNA | 抗dsRNA單克隆抗體J2、K1和K2的陽性對照 |
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