活死細胞活力分析試劑盒助力研究壞膽固醇的好處

膽固醇,以LDL的形式,表現出一種有趣的能力,刺激T細胞對腫瘤的免疫潛力。

壞膽固醇的好處

免疫療法被認為是我們對抗癌癥能力的重要一步。這個概念是,我們可以使用人體自身的免疫系統,和或關于免疫監視過程如何感知癌細胞的關鍵信息,來靶向和抑制萌芽的腫瘤。一種在一些但不是所有患者中顯示出希望的策略是靶向PD-1(程序性細胞死亡1)受體。這種蛋白質通常阻止T細胞攻擊自己體內的其他細胞。但其配體PD-L1似乎在一些癌細胞中高度上調,使它們對T細胞攻擊不可見。某些癌癥藥物如納武單抗(Optivo)通過阻斷PD-1/PD-L1相互作用發揮作用,從而刺激免疫系統殺死異常細胞(如腫瘤中的細胞)的自然趨勢。

一些物質已被證明是生物標志物,或這種抑制性相互作用的“廣播”,阻止免疫治療的最大功效。簡單的膽固醇分子就是這些生物標志物之一。在一些研究中,添加膽固醇可以改善接受癌癥免疫治療的患者的結果。但原因尚不清楚,很明顯,過多的膽固醇對身體有害。因此,來自德國的一組科學家試圖闡明膽固醇和T細胞之間復雜的相互作用,希望這種理解可以改善我們在腫瘤學領域的免疫治療。

作者進行了一系列實驗,其中血清LDL(低密度脂蛋白)或“壞”膽固醇水平與T細胞表型和代謝相關。他們使用CD-4+和CD-8+?T細胞并在體外培養它們。他們加入LDL并觀察T細胞的反應如何,包括與腫瘤球體(模擬細胞聚集體特征的3D細胞模型)共培養的情況。使用流式細胞術,ELISA,氧氣和pH監測,他們可以跟蹤T細胞-和球狀體-對不同水平的LDL補充的反應。使用TheWell Bioscience的Cyto 3D ™活-死測定試劑盒測定球狀體的活力。

通過這些技術,作者發現大量LDL導致T細胞中PD-1的下調,并且這些T細胞顯示出更“正?!钡谋硇?,活性氧(ROS)的產生減少。當這些T細胞與結腸直腸癌(CRC)細胞模擬物的球狀體一起孵育時,確實可以抑制它們的活力。作者認為,這種增加的抗癌作用,通過更高水平的膽固醇刺激,可以由T細胞介導,這些T細胞不那么“疲憊”,更能夠執行其腫瘤細胞殺傷功能。然而,在對膽固醇提出具體的治療建議之前,還需要更多的研究來微調我們對這種復雜的細胞和分子舞蹈是如何進行的理解。

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吖啶橙子(AO)和碘化丙啶(PI)均為核染色(核酸結合)染料,用于本試劑盒。AO對活細胞和死細胞都是可滲透的,并將所有有核細胞染色以產生綠色熒光。PI僅穿透具有受損膜的有核細胞的膜,并將死細胞染色以產生紅色熒光。由于淬滅,當細胞用AO和PI染色時,所有活的有核細胞發綠色熒光,所有死的有核細胞發紅色熒光(PI通過熒光共振能量轉移(FRET)降低AO的熒光強度)。無核物質,如紅細胞,血小板和碎片不發熒光,被熒光顯微鏡忽略。

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