細胞毒性是由細胞或化學物質引起的一種單純的細胞殺傷過程,其細胞死亡機制不依賴于凋亡或壞死。細胞毒性檢測主要通過觀察細胞膜通透性的改變來進行評估,通?;诩毎|膜的損傷程度進行定量分析。
【優選方法】
LDH(乳酸脫氫酶法)方法:通過檢測細胞培養上清中LDH的酶活性,來檢測細胞毒性,同時也是現如今科研工作者最快捷的檢測方式。?乳酸脫氫酶(LDH,Lactate dehydrogenase)是一種穩定的酶,存在于所有細胞類型中,并且在質膜損傷后迅速釋放到細胞培養基中。因此,LDH是細胞毒性研究中使用最廣泛的標記物。
【細胞毒性檢測試劑盒產品基本信息】
規格:480T
儲存:-20℃保存6個月
原理:
細胞毒性檢測試劑盒該測定基于在典型的細胞毒性測定中,將靶細胞與細胞毒性化學試劑或細胞毒性細胞(NK細胞,細胞毒性T細胞)一起培養,以誘導靶細胞死亡和LDH釋放。將含有LDH的上清液轉移至新的96孔測定板的孔中,并與LDH Reaction Solution混合。在LDH的作用下,NADH和四唑鹽MTT反應生成NAD+?和MTT的還原形式,該MTT的還原形式在565 nm處表現出最大吸收,產生的顏色強度與裂解的細胞數直接相關。在室溫下孵育30分鐘后,使用酶標儀讀取565 nm的吸光度。
特點:
- 分析化合物或環境因素對細胞死亡的作用。
- LDH從細胞內被釋放到培養基中,形成了一個可視化的顏色反應。
- 檢測范圍:10,00-100,0000個洗細胞/孔。
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