體內實驗,PDX/CDX 異種移植:高濃度基質膠

基質膠作為一種重要的細胞外基質,具有廣泛的應用價值。它可以用于各種研究領域,如細胞生物學、組織工程、腫瘤研究等?;|膠的特殊成分和結構為細胞提供了理想的生長環境,促進細胞的黏附、遷移和增殖。同時,基質膠還可以模擬人體組織的結構和功能,為研究人員提供了重要的工具。

高濃度基底膜基質膠在細胞培養和研究中有廣泛的應用。它為各種實驗提供了理想的基質環境,如體內實驗,PDX/CDX 異種移植和腫瘤成瘤模型的實驗等。通過使用高濃度基底膜基質膠,研究人員可以更好地模擬體內細胞與基質之間的相互作用,進一步了解細胞行為和組織發育的機制。

高濃度基底膜基質膠的應用非常靈活??梢允褂煤駥幽z法或薄層包被法將基質膠涂覆在培養表面上,具體操作可根據實驗需求進行選擇。該產品經過嚴格的質量認證,確保無病原體污染,并通過多種實驗驗證其生物功能。

無論您是進行細胞培養、組織工程研究還是腫瘤研究,Biogradetech基質膠都是您的理想選擇。它為您的實驗提供了可靠的3D培養基質支持,幫助您更好地理解細胞行為和組織發育的奧秘。立即嘗試高濃度的基質膠,開啟您的細胞研究新篇章!

 

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產品貨號 英文名稱 中文名稱 應用類型
A-MGL24 HC Basement Membrane Matrix (For in vivo experiments, PDX and CDX) 高濃度,基質膠(體內實驗,PDX/CDX 異種移植) 藍海領域:3D培養,類器官培養,干細胞培養

產品英文名稱:HC Basement Membrane Matrix (For in vivo experiments, PDX and CDX)

產品中文名稱:高濃度,基質膠(體內實驗,PDX/CDX 異種移植)

貨號:A-MGL24

規格:5mL、10mL

儲存條件:≤-20°C

 

產品描述:

Biogradetech貨號A-MGL24高濃度的基質膠是一種連續的特殊細胞外基質薄膜,形成了內皮細胞、上皮細胞、肌肉細胞或神經細胞與其相鄰基質之間的界面?;|膠在發育和傷口愈合過程中會被降解和再生。它不僅支持細胞和細胞層,還對組織結構起著重要作用,影響細胞的粘附、遷移、增殖和分化?;|膠能夠成為轉移性腫瘤細胞侵襲的主要屏障。

Biogradetech貨號A-MGL24高濃度的基質膠是從Engelbreth-Holm-Swarm(EHS)腫瘤中純化得到的可溶性基質膠。此高濃度的基質膠在37°C下形成重組基底膜基質膠。高濃度的基質膠的主要成分包括層粘連蛋白、IV型膠原、粘連素和肝素硫酸酯蛋白聚糖。

 

適用范圍:

該系列分為標準型高濃度和低生長因子高濃度,其濃度和粘度均高于普通濃度的基質膠,更適合于體內實驗(動物模型),如PDX、CDX、體內血管生成測定等。

 

產品參數:

  1. 來源:小鼠腫瘤;
  2. 顏色:含酚紅的基質膠呈黃粉色,無酚紅的基質膠呈半透明淡黃色;
  3. 形態:標準型基質膠在4°C下溶解為透明液體;高濃度基質膠在0°C下溶解后為透明液體,長時間放置于4°C后會半凝膠化。
  4. 濃度:蛋白質濃度范圍為8至26 mg/mL。
  5. 內毒素:≤ 4.5 EU/mL
  6. 凝膠時間:室溫下5-30分鐘凝膠,當溫度從22°C升至37°C時,凝膠形成速度加快。

 

包被涂層方法:

打造成功的細胞培養環境,關鍵在于選擇合適的基質膠。其中,基質膠的包被涂層方法對于不同的應用需求有所不同。下面,我們將介紹基質膠的包被涂層步驟,幫助您輕松應對各種細胞培養挑戰。

首先,讓我們來了解一下基質膠的解凍過程。將Biogradetech貨號A-MGL24高濃度的基質膠在2-8°C的冰箱中過夜解凍。由于冰箱溫度可能有所不同,因此建議在解凍過程中將基質膠放在冰上保持低溫,以防止過早凝膠化。解凍后的基質膠在15°C以上的溫度下會迅速凝固,因此在使用時要保持冰上狀態,以避免不必要的凝膠形成。

Biogradetech貨號A-MGL24高濃度的基質膠有許多應用場景,需要不同的厚度和濃度。例如,用于內皮細胞形成類似毛細血管的結構(管狀結構形成實驗)、大鼠主動脈組織分化為類似毛細血管的結構(主動脈環形成實驗)、上皮器官樣結構形成或腫瘤器官樣結構形成,需要較厚的凝膠,也就是厚層凝膠法。而一些應用,如原代細胞的傳代培養,需要薄層涂層而不是厚凝膠,因此應采用薄層凝膠法。

 

厚層凝膠法:

  1. 按上述方法解凍基質膠;
  2. 緩慢上下移液將基質膠混勻,注意不要引入空氣泡;
  3. 向細胞培養板表面加入200-300μL/cm2基質膠,平鋪均勻,注意避免產生氣泡;
  4. 將培養板放置在 37 ℃,等待 30 min 形成凝膠即可使用。

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薄層包被法:

  1. 按上述方法解凍基質膠;
  2. 緩慢上下移液將基質膠混勻,注意不要引入空氣泡;
  3. 根據實驗需求使用預冷的培養基稀釋。建議將基質膠稀釋為1:100以用于原代細胞的擴增。對于您的應用,可能需要經驗性地確定最佳涂層濃度;
  4. 加入適量體積的該溶液覆蓋整個細胞培養板表面。建議加入300μL/cm2的溶液;
  5. 將培養板放置在室溫,孵育至少1h;
  6. 吸去上清即可使用。不要讓涂層表面干燥。

 

通過以上步驟,您可以根據不同的細胞培養需求,靈活選擇適合的基質膠涂層方法。無論是厚凝膠還是薄層涂層,都能為您的細胞研究提供穩定的3D培養支持,助您取得優異的實驗結果。趕快嘗試基質膠涂層方法,提升您的細胞培養實驗效果吧!

 

實驗操作示例:小鼠皮下腫瘤形成

  1. 設備、試劑和耗材

1.1 設備:生物安全柜,細胞培養箱,低溫臥式離心機,倒置顯微鏡;

1.2 試劑:基質膠(貨號: A-MGL21 / A-MGL23 / A-MGL24 / A-MGL26 ),基礎培養基,含有10%胎牛血清的培養基,1×PBS,胰蛋白酶溶液;

1.3 耗材:無菌移液器槍頭、10cm細胞培養皿、無菌EP管、一次性注射器和其它耗材(或根據實驗設計進行調整)。

 

  1. 實驗內容和方法

2.1. 將Biogradetech貨號A-MGL24高濃度的基質膠放入冰盒中,在4°C的冰箱中慢慢解凍過夜;

2.2. 選擇生長狀況良好且呈對數生長的細胞,棄去上清液,加入2 mL 1×PBS溶液輕輕洗滌,棄去液體;

2.3. 在培養皿中加入1 mL 0.25%胰蛋白酶細胞消化液,靜置10秒鐘,棄去胰蛋白酶,用殘留的胰蛋白酶在室溫下繼續消化1~3分鐘;

2.4. 當細胞變圓(請記住,不能消化到細胞邊緣清晰時),加入1 mL含有10%胎牛血清的培養基終止消化。小心地吹散細胞,將細胞懸浮液收集到15 mL塑料離心管中;

2.5. 以1000 rpm離心3分鐘,棄去上清液。用PBS洗滌細胞一次后,通過加入無血清基礎培養基重新懸浮細胞,并取10 μL細胞懸液進行細胞計數;

2.6.

HepG2細胞:每只小鼠接種500萬個細胞。根據細胞密度,將所需的細胞懸液放入無菌的1.5 mL塑料離心管中,以1000 rpm離心3分鐘。棄去上清液,加入無血清培養基或PBS,直到總體積為300 μL;

HCT-116細胞:每只小鼠接種100萬個細胞。根據細胞密度,將所需的細胞懸液放入無菌的1.5 mL塑料離心管中,以1000 rpm離心3分鐘。棄去上清液,加入無血清培養基或PBS,直到總體積為300 μL;

MIA-PaC-2細胞:每只小鼠接種1000萬個細胞。根據細胞密度,將所需的細胞懸液放入無菌的1.5 mL塑料離心管中,以1000 rpm離心3分鐘。棄去上清液,加入無血清培養基或PBS,直到總體積為500 μL;

2.7. 基質膠的混合:將細胞懸液與基質膠以1:1的比例在4°C下混合;

2.8. 皮下注射:左手將裸鼠固定住,右手將細胞懸液皮下注射到裸鼠的右背部。在接種過程中,將針頭稍微插入皮下,約深1cm,以減少注射后細胞懸液從注射點溢出,注射體積為100 μL。MIA-PaC-2細胞注射200 μL/個;

2.9. 數據記錄:將裸鼠放回籠子繼續飼養,根據實驗要求定期測量腫瘤體積,記錄數據并繪制曲線,在腫瘤體積小于2000 mm3之前,安樂死裸鼠,取出腫瘤并拍照記錄。

 

Biogradetech是生命科學和醫藥研發行業關鍵原料與試劑的領先供應商。他們提供廣泛的產品組合,包括細胞生物學、蛋白質組學、分子生物學、免疫學、微生物學、診斷學、生物化學、神經科學、血液分析和高通量藥物篩選等領域的試劑。Biogradetech的產品受到全球生物研究機構和生物制藥公司的高度追捧,他們以高質量、可靠性和服務而聞名。

Biogradetech成立于2015年,總部位于美國加利福尼亞州,早期以產品技術研發服務起家,逐步發展了廣泛的產品線,并將其商業化銷售,包括蛋白質、抗體、酶、培養基、試劑盒和儀器。其產品均在嚴格的全球標準下生產,Biogradetech還提供專業的技術支持,幫助客戶選擇正確的產品,并正確使用產品。Biogradetech致力于為客戶提供高質量的產品和服務,是那些尋求高質量試劑和可靠結果的人值得信賴的合作伙伴。

為了更好地滿足亞太地區客戶的需求并提升交付速度,Biogradetech在香港設立現貨中心,將能更迅速地滿足客戶的需求,確保訂單的高效處理,并加速產品的交付和配送,從而提供更快速、可靠的服務。

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