Solis BioDyne帶你玩轉長片段PCR

 

多聚酶鏈反應(polymerase chain reaction, PCR)是1983年由Mullis首創的一種通過體外酶促擴增反應快速獲取大量特定DNA序列的方法,目前已在分子生物學、分子遺傳學、醫學等領域得到廣泛應用。但是傳統的PCR通常只能擴增3kb以內的短片段,對于3kb以上的長片段很難進行有效擴增。

 

長片段PCR受限制的原因有:①常用的Taq酶無3’→5’核酸外切酶活性,無校對功能,易產生錯配堿基,導致鏈合成提前終止;②Taq酶在PCR過程中活力降低;③非特異性擴增干擾長片段的延伸;④PCR過程本身損傷了模板(脫嘌呤或斷裂),導致長片段無法合成。

 

長片段PCR

 

Solis BioDyne多年專注PCR相關試劑的研發與生產,可提供相對長片段PCR的兩種DNA聚合酶(FIREPol??Blend Master Mix)進行反應:一種是常規PCR反應中應用的耐熱FIREPol??DNA聚合酶,它具有很強的延伸能力,依賴此酶進行鏈的延伸;另一種是具有3’→5’核酸外切酶活性的DNA聚合酶,它具有較好的校讀功能,可以將錯配的堿基切割下來重新利用第一種酶進行鏈的延伸。兩種酶各有優缺點,充分利用第一種酶的延伸能力和第二種酶的校讀功能,使兩種酶在反應中相輔相成,完成長片段DNA的擴增。

 

長片段DNA擴增

 

性能:

? 保真度高:保真度是普通Taq酶的5倍;

??準確性高:將耐熱的DNA聚合酶、增強的延伸功能、校正功能結合起來;

??片段更長:目前已驗證可穩定合成λDNA?8kd, 人類基因組DNA 5kd;

??擴增產物:適用于平端克??;

??性能增強:使用優化的組分,產量、靈敏度、特異性顯著提高;

??穩定性好:室溫可放置1個月,擴增效率不受影響。

 

名稱 貨號 特征 備注
5x HOT FIREPol??Blend Master Mix Ready to Load 04-25-00115 7.5 mM MgCl2 含染料,在PCR結束后可以直接電泳,無需加入上樣緩沖液。
5x HOT FIREPol??Blend Master Mix Ready to Load 04-25-00120 10 mM MgCl2
5x HOT FIREPol??Blend Master Mix Ready to Load 04-25-00125 12.5 mM MgCl2
5x HOT FIREPol??Blend Master Mix Ready to Load 04-25-00130 15 mM MgCl2
5x HOT FIREPol??Blend Master Mix 04-27-00115 7.5 mM MgCl2 不含染料,無色
5x HOT FIREPol??Blend Master Mix 04-27-00120 10 mM MgCl2
5x HOT FIREPol??Blend Master Mix 04-27-00125 12.5?mM MgCl2
5x HOT FIREPol??Blend Master Mix 04-27-00130 15 mM MgCl2

 

Solis BioDyne來源于歐盟-愛沙尼亞共和國,自1995年以來,Solis BioDyne一直致力于開發和生產高品質的生命科學試劑,現已成為當今歐洲領先的試劑供應商之一。高標準的生產標準和服務使Solis BioDyne成為全球值得信賴的首選PCR供應商。我們的DNA聚合酶,PCR Master Mixes,qPCR Mixes和其它試劑被全球110多個國家的研究者所使用,包括頂級研究機構和生物技術公司。

 

艾美捷科技與國內外優秀的生物試劑供應商保持著密切的合作關系,目前已成為眾多國際知名品牌的中國總代理或一級代理,主要包括:Abbkine、AAT Bioquest、Abnova、Agrisera、Alomone Labs、Biovision、Biosensis、開曼生物、Caisson Labs、Cytoskeleton、Epigentek、Equitech-Bio、Hycult Biotech、Jackson、LifeSensors、ProSpec、PhytoAB、Norgen Biotek、Mabtech、iRegene、StressMarq、Trevigen、ImmunoReagents、SouthernBiotech、Origene、US Biological、Solis BioDyne等,可以在第一時間為用戶提供最前沿的專業資訊、完備的產品及物流服務。

 

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