如何選擇最亮的熒光染料?熒光亮度排行來啦!

 

熒光染料是細胞生物學等科學研究中不可或缺的重要工具,熒光濾色塊是熒光顯微鏡中至關重要的一個部件。我們大家在操作熒光染料亮度的時候,我們可以按照上面的比較方法去比較熒光染料的亮度,那么一般熒光染料亮度怎么進行比較?

 

熒光染料的亮度可以用來比較不同熒光染料的熒光標記效果,通過陰性細胞群與陽性細胞群的熒光信號之間的關系來表示。但陰性細胞群的熒光信號受到信號強度、自發熒光、非特異性染色、儀器的電子噪聲等多個因素相關。

 

熒光染料染色指數是陽性細胞群的平均熒光強度與陰性細胞群的平均熒光強度之差與陰性細胞群熒光強度標準差之間比值的一半。熒光染料染色系數只和抗體克隆與質量、熒光團純度與質量、熒光修飾比、激光線及其功率、長通和帶通濾光片、目的細胞等因素相關。

 

熒光染料的染色指數與熒光染料的亮度呈正相關,也就是熒光染料亮度越高,染色系數也就高。

 

DNA染料:

 

Cell Navigator™脂質液滴熒光測定試劑盒

圖1.Cell Navigator™脂質液滴熒光測定試劑盒(Cat#22735)和Nuclear Green™LCS1(Cat#17540)染色的油酸處理過的HeLa細胞的熒光圖像。

 

染料名稱 標記部位 激光 濾光片組 亮度
DAPI(17510) DNA 355 nm DAPI 6
Nuclear Blue(17548) DNA 355 nm DAPI 6
Nuclear Green(17540) DNA 488 nm FITC 6
Nuclear Orange(17541) DNA 488 nm Cy3 6
Propidium Iodide(17515) DNA 532 nm Texas Red 3
Nuclear Red(17542) DNA 633 nm Cy5.5 6

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細胞增殖染料

 

細胞增殖染料

圖2.CytoTell™GreenCFSE進行的細胞增殖測定。在第0天,用CytoTell™Green或CFSE對Jurkat細胞(?2×106細胞/ mL)進行染色。在指定的那天,以1:1的比例連續通過細胞。在通過當天,在FITC通道中用ACEA NovoCyte 3000流式細胞儀測量熒光強度。連續幾代人以不同的顏色代表。

 

染料名稱 功能 激光 濾光片 亮度
CytoTell Blue(22251) 增殖 405 nm DAPI 6
CFSE(22022) 增殖 488 nm FITC 7
CytoTell Green(22253) 增殖 488 nm FITC 7
CytoTell Orange(22257) 增殖 488 nm Cy3/TRITC 7
CytoTell UltraGreen(22240) 增殖 488 nm FITC 7
CytoTell Red 590(22261) 增殖 561 nm Cy3 7
CytoTell Red 650(22255) 增殖 633 nm Cy5 7

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細胞活力檢測染料

 

細胞活力檢測染料

圖3.用CytoCalcein Violet 500(Cat#22013)染色的活HeLa細胞圖像。細胞核用Hoechst 33342(Blue,Cat#17535)染色。

 

染料名稱 功能 激光 濾光片 亮度
Calcein Blue(22006) 細胞活力 405 nm DAPI 6
Calcein UltraBlue(21908) 細胞活力 405 nm DAPI 6
CytoCalcein Violet 450(22012) 細胞活力 405 nm DAPI 7
CytoCalcein Violet 500(22013) 細胞活力 405 nm FITC 7
Calcein(22001) 細胞活力 488 nm FITC 7
Calcein Orange(22008) 細胞活力 488 nm TRITC 7
Calcein UltraGreen(21905) 細胞活力 488 nm FITC 7
7-AAD(17501) 細胞活力 532 nm Cy5 2
Calcein Red(21900) 細胞活力 561nm Cy3/TRITC 7
Calcein Deep Red(21902) 細胞活力 633 nm Cy5 7

 

熒光標記染料

 

熒光標記染料?

圖4.將?HeLa細胞與(Tubulin +)或不與(Tubulin-)小鼠抗微管蛋白一起孵育,然后與iFluor™488山羊抗小鼠IgG綴合物(綠色,左)或AlexaFluor?488山羊抗小鼠IgG綴合物(綠色,右)。細胞核用Hoechst 33342(藍色)染色。

 

染料名稱 功能 激光 濾光片 亮度
Alexa Fluor 350 標記 355 nm DAPI 2
iFluor 350(1020) 標記 355?nm DAPI 6
iFluor 450(1026) 標記 405?nm FITC 5
Pacific Green 標記 405?nm FITC 5
Pacific Orange 標記 405?nm TRITC 2
iFluor 405(1021) 標記 405?nm DAPI 6
iFluor 430(1052) 標記 405?nm FITC 6
Pacific Blue(570) 標記 405?nm DAPI 2
Alexa Fluor 555 標記 488?nm TRITC 4
Cy3(141) 標記 488?nm TRITC 4
Alexa Fluor 488(1812) 標記 488?nm FITC 5
FITC 標記 488?nm FITC 7
iFluor 488(1023) 標記 488?nm FITC 7
Oregon Green 標記 488?nm FITC 7
TRITC 標記 488?nm TRITC 7
PE-Alexa Fluor 594 標記 488?nm Texas Red 9
PE-Alexa Fluor 750 標記 488?nm Cy7 9
PE-iFluor 594(2584) 標記 488?nm Texas Red 9
PE-iFluor 750(2578) 標記 488?nm Cy7 9
PE(2558) 標記 488?nm TRITC 10
PE-Alexa Fluor 647 標記 488?nm Cy5 7
PE-Cy5(2610) 標記 488?nm Cy5.5 10
PE-Cy5.5(2613) 標記 488?nm Cy5.5 7
PE-Cy7(2616) 標記 488?nm Cy7 10
PE-iFluor 647(2577) 標記 488?nm Cy5 10
PE-Texas Red(2619) 標記 488?nm Texas Red 10
Alexa Fluor 555(1821) 標記 532?nm TRITC 5
Alexa Fluor 532(1819) 標記 532?nm TRITC 7
iFluor 514(1024) 標記 532?nm Cy3/TRITC (590/40) 7
iFluor 532(1025) 標記 532?nm Cy3/TRITC (590/40) 7
iFluor 546(1048) 標記 532?nm Cy3/TRITC (590/40) 7
Alexa Fluor 594(1830) 標記 561?nm Texas Red 6
iFluor 610(1038) 標記 561?nm Texas Red (610/40) 6
Texas Red(480) 標記 561?nm Texas Red 6
iFluor 555(1028) 標記 561?nm Cy3/TRITC (590/40) 7
iFluor 568(1049) 標記 561?nm Cy3/TRITC (590/40) 7
iFluor 594(1029) 標記 561?nm Texas Red (610/40) 7
Alexa Fluor 750(1839) 標記 633?nm Cy7 4
iFluor 750(1037) 標記 633?nm Cy7 (780/60) 4
iFluor 680(1035) 標記 633?nm Custom (712/25) 5
Alexa Fluor 680(1835) 標記 633?nm Cy5.5 6
Alexa Fluor 700(1836) 標記 633?nm Cy7 6
Cy7(290) 標記 633?nm Cy7 6
iFluor 647(1031) 標記 633?nm Cy5 (660/40) 6
iFluor 660(1032) 標記 633?nm Cy5 (660/40) 6
iFluor 700(1036) 標記 633?nm Custom (712/25) 6
Alexa Fluor 647(1833) 標記 633?nm Cy5 7
Cy5(151) 標記 633?nm Cy5 7
iFluor 633(1030) 標記 633?nm Cy5 (660/40) 7
APC-Alexa Fluor 750 標記 633?nm Cy7 8
APC-Cy5.5(2622) 標記 633?nm Cy5.5 8
APC-Cy7(2625) 標記 633?nm Cy7 5
APC-iFluor 700(2570) 標記 633?nm Cy7 8
APC-iFluor 750(16908) 標記 633?nm Cy7 8
APC(2554) 標記 633?nm Cy5 9
iFluor 790(1368) 標記 633?nm Cy7 (780/60) 3
iFluor 800(1379) 標記 633?nm Custom (840/20) 3
iFluor 810(1389) 標記 633?nm Custom (840/20) 3
iFluor 820(1399) 標記 633?nm Custom (840/20) 3
iFluor 860(1409) 標記 633?nm Custom (885/40) 3

 

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