彗星檢測試劑盒,你可能遇到的幾種問題,這里都有!

 

彗星實驗(Comet assay)也被稱為單細胞凝膠電泳實驗(Single cell gel electrophoresis,SCGE),是一種在單細胞水平上檢測DNA損傷的技術。

 

彗星分析專用玻片

?貨號 名稱 規格 說明
STA-352 Comet Assay Slides, 3-Well 5 slides 彗星分析專用玻片
STA-353 25 slides
STA-353-5 5 x 25 slides
STA-356 Comet Assay Slides, 96-Well 1 slide 彗星分析專用玻片
STA-356-5 5 slides

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彗星分析試劑盒

貨號 名稱 規格 說明
STA-350 Comet Assay Kits, 3-Well 15 assays 彗星分析試劑盒
?
STA-351 75 assays
STA-351-5 5 x 75 assays
STA-355 Comet Assay Kits, 96-Well 96 assays
STA-355-5 5 x 96 assays

?

常見問題解析:

 

Q1:彗星玻片是否可以單獨提供?

A1:可以的。有對應單獨玻片的產品:cat#STA-352 ?3孔/玻片,共5片;cat#STA-353 3孔/玻片,共25片;cat#STA-356 96孔/玻片,共1片

Q2:彗星玻片可以重復使用嗎?

A2:不能。彗星玻片表面經過了特殊處理,一旦整個玻片經歷了變性,電泳和洗滌的操作步驟,就不能再重復使用了。

Q3:可以用常規載玻片代替試劑盒中的彗星玻片嗎?

A3:不能,彗星玻片經過化學預處理,以增加附著力。如果采用常規載玻片的話,您的細胞/瓊脂糖液滴將無法停留在載玻片上。

Q4:彗星玻片有多厚?

A4:1.0mm(底層厚度,不包含藍色層)

Q5:該彗星分析試劑盒適合用哪種電泳儀?

A4:該彗星分析試劑盒可用于任何水平電泳槽,不限于任何特定型號,但不能使垂直電泳儀。

Q6:該試劑盒是否適用于植物組織樣本?

A7:可以用于植物組織。彗星試劑盒用于檢測單細胞懸液的DNA損傷,與任何細胞類型兼容,只要將樣本制備為單細胞懸液即可。

Q7:用試劑盒的Vista Green染料染色后,玻片可以保存多久?

A7:用Vista Green染色后的玻片可在4oC的黑暗環境中保存3個月,熒光也不褪色。 干燥且未沾有Vista Green的載玻片可以保存一年。

Q8:說明書中配置電泳液的過程中沒有提到是否需要滅菌?

A8:不需要滅菌。如果配置的過程中發現有不溶物,可以進行過濾處理。

Q9:什么是好的陽性對照?

A9:用20uM依托泊苷(etoposide)培養細胞4小時,作為彗星實驗的陽性對照。

Q10:是否有化合物誘導DNA損傷的彗星分析數據供參考呢?

A10:與ELISA不同,彗星實驗不提供對照,因為任何彗星實驗結果都將根據實驗條件的不同而變化。例如,如果電泳條件不同,則包含相同數量 DNA 損傷的細胞的尾巴大小可能會不同。所以,與我們的結果或其他研究人員的結果進行比較將毫無意義,因為兩者之間的條件永遠不會相同。如果您有興趣測試化合物對DNA損傷的影響,建議保持所有實驗條件一致,并使用相同的運行時間和軟件進行分析。

Q11:如何防止瓊脂糖凝膠從載玻片上脫落?

A11:彗星玻片經過化學處理,表面帶有粘性,可吸附瓊脂糖。瓊脂糖從玻片上脫落,主要是因為瓊脂糖-細胞混合液添加到玻片孔上時,未完全覆蓋。必須保證瓊脂糖凝膠完全覆蓋在孔上,另外玻片始終保持水平狀態也很重要。

 

2020~2021最新發表文章:

  1. Maksimova, V. et al. (2021). HeLa TI cell-based assay as a new approach to screen for chemicals able to reactivate the expression of epigenetically silenced genes.?PLoS One.?16(6):e0252504. doi: 10.1371/journal.pone.0252504.
  2. Chong, S.J.F. et al. (2020). Serine-70 phosphorylated Bcl-2 prevents oxidative stress-induced DNA damage by modulating the mitochondrial redox metabolism.?Nucleic Acids Res. doi: 10.1093/nar/gkaa1110.
  3. Prendergast, L. et al. (2020). Histone chaperone FACT is essential to overcome replication stress in mammalian cells.?Oncogene. doi: 10.1038/s41388-020-1346-9.
  4. Kong, L.R. et al. (2020). Targeting codon 158 p53-mutant cancers via the induction of p53 acetylation.?Nat Commun.?11(1):2086. doi: 10.1038/s41467-020-15608-y.
  5. Kisin, E. R. et al. (2020). Enhanced morphological transformation of human lung epithelial cells by continuous exposure to cellulose nanocrystals.?Chemosphere. doi: 10.1016/j.chemosphere.2020.126170.

 

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文章來源:【復盤】Comet Assay Kits彗星檢測試劑盒常見問題

 

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