研究細胞凋亡,你得“對癥下藥”!

What’s細胞凋亡?What happened to細胞凋亡?

 

細胞凋亡是為維持內環境穩定,受生理或病理一些因素的影響,細胞遵循的一種有序的程序性死亡。細胞發生凋亡,首先細胞體積縮小,連接消失,然后細胞質密度增加,線粒體膜電位消失,通透性改變,釋放細胞色素C到胞漿,核質濃縮,核膜核仁破碎,DNA降解成為片段,最終形成凋亡小體,被巨噬細胞吞噬。

細胞凋亡

細胞凋亡是一個動態過程,此間涉及一系列復雜的生化反應,多個基因的表達調控、信號轉導,多種酶參與的級聯反應和多種信號通路。細胞感受到相應的凋亡信號刺激,胞內一系列控制開關的開啟或關閉,多種酶的活化,引發一系列級聯反應。不同的外界因素啟動凋亡的方式不同,所引起的信號轉導也不相同。

 

What’s早期凋亡?What happened to早期凋亡?

 

特征一:脂膜內側外翻

 

在正常細胞中,磷脂酰絲氨酸(PS)只分布在細胞膜脂質雙層的內側,細胞發生凋亡早期, PS由脂膜內側翻向外側。Annexin V是一種分子量為35-36kD鈣依賴性磷脂結合蛋白,與PS有高度親和力,它通過細胞外側暴露的PS與凋亡早期細胞的胞膜結合。因此Annexin V是檢測細胞早期凋亡的靈敏指標。通常,使用一些熒光探針標記Annexin V,就可以簡單直接地檢測到PS外翻這一細胞凋亡的重要特征。

 

熒光探針

檢測工具:

 

產品名稱 貨號
Abbkine Annexin V-AbFluor™ 405 Apoptosis Detection Kit KTA0001
Abbkine Annexin V-AbFluor™ 488 Apoptosis Detection Kit KTA0002
Abbkine Annexin V-AbFluor™ 555 Apoptosis Detection Kit KTA0003
Abbkine Annexin V-AbFluor™ 647 Apoptosis Detection Kit KTA0004

特質:

Abbkine專利AbFlourTM系列特色熒光染料(藍色、綠色、紅色)標記重組人Annexin V蛋白,與PI搭配,推出不同熒光凋亡檢測試劑盒,適用于用流式細胞儀、熒光顯微鏡等熒光設備的檢測。

 

特征二:線粒體膜電位下降

正常線粒體膜電位是維持線粒體進行氧化磷酸化、產生ATP的前提,是維持線粒體功能所必需,線粒體膜電位的下降是細胞凋亡早期的一個標志性事件,JC-1是一種廣泛用于檢測線粒體膜電位的理想熒光探針,線粒體膜電位較高時,JC-1聚集在線粒體的基質中,形成聚合物(J-aggregates),可以產生紅色熒光(Ex/Em = 585/590),線粒體膜電位較低時,JC-1不能聚集在線粒體的基質中,此時JC-1為單體(monomer),可以產生綠色熒光(Ex/Em = 510/527 nm)。

 

檢測工具:

 

產品名稱 貨號
Mitochondrial Membrane Potential Assay Kit (JC-1) KTA4001

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特質:

 

Abbkine線粒體膜電位分析試劑盒(JC-1),以JC-1 為熒光探針,快速靈敏地檢測線粒體膜電位的變化,此試劑盒可以非常方便地通過熒光顏色的轉變來檢測線粒體膜電位的變化。

線粒體膜電位分析試劑盒

 

What’s期凋亡?What happened to期凋亡?

 

細胞凋亡中, 尤其凋亡晚期,染色體DNA會發生斷裂,產生大量的粘性3'-OH末端,可在脫氧核糖核苷酸末端轉移酶(TdT)的作用下,將脫氧尿苷三磷酸核苷酸(dUTP)和熒光素形成的衍生物標記到DNA的3'-末端,即脫氧核糖核苷酸末端轉移酶介導的缺口末端標記法(TUNEL)。正常的或正在增殖的細胞幾乎沒有DNA的斷裂,很少能夠被染色。由此,TUNEL是檢測細胞凋亡后期DNA片段化的最常用方法。

 

染色體DNA

 

檢測工具:

 

產品名稱 貨號
TUNEL Apoptosis Detection Kit (Green Fluorescence) KTA2010
TUNEL Apoptosis Detection Kit (Orange Fluorescence) KTA2011

 

特質:

Abbkine的TUNEL法細胞凋亡檢測試劑盒提供實驗所需的全套試劑組分以及優化的實驗方案,適用于熒光酶標儀、熒光顯微鏡、流式細胞儀等多種儀器,可用于檢測貼壁細胞,懸浮細胞,石蠟包埋組織切片,冰凍切片等多種樣品類型。

 

細胞凋亡一旦開始便無法停止,它是一個高度調控的過程。

 

細胞凋亡可通過兩種起始途徑啟動,內始式途徑由非受體刺激激活,如DNA損傷、內質網應激、代謝應激,線粒體外膜通透性改變,如細胞色素c釋放,外源途徑通過死亡受體與配體結合(如FasL,腫瘤壞死因子TNF)開始。

 

此后,這兩種途徑都匯合于caspase級聯反應,通過激活caspase蛋白酶或降解蛋白質的酶來誘導細胞死亡??沟蛲雠潴w,如細胞因子,生長因子,通過不同的信號分子如AKT和p90RSK和抗凋亡蛋白,如Bcl-2和Bcl-x促進細胞的存活、增殖和分化。這些細胞因子和生長因子的退出導致細胞死亡。

 

細胞凋亡

 

檢測工具:

 

產品名稱 貨號 應用
Bax Mouse Monoclonal Antibody (6F11) ABM40273 IF, IHC-p, WB
Bcl-2 Monoclonal Antibody ABM40041 IF, IHC-p, WB
Bad Polyclonal Antibody ABP55880 ELISA, IF, IHC-p, WB
p53 Monoclonal Antibody ABM40052 IF, IHC-p, WB
FAS Polyclonal Antibody ABP51327 ELISA, IF, IHC-p, WB
Caspase-3 Polyclonal Antibody ABP52935 ELISA, IF, IHC-p, WB
Caspase-8 Polyclonal Antibody ABP50858 ELISA, IF, IHC-p, WB
Caspase 9 Monoclonal Antibody ABM40077 IF, IHC-p, IP, WB
NFkB p65 Monoclonal Antibody ABM40111 IF, IHC-p, IP, WB

 

特質:

Abbkine精選細胞凋亡系列皇冠抗體,經過多重嚴格驗證,適用于多種細胞應用,滿足大多數客戶的研究需求,優異的結果如下:

 

【1】 大鼠肺組織免疫熒光分析,使用Caspase-3多克隆抗體,1:200稀釋。

 

多克隆抗體

 

【2】石蠟包埋人子宮組織的免疫組化分析,使用Bad多克隆抗體,1:200稀釋。

 

Bad多克隆抗體

 

Abbkine服務于全球蛋白組學和細胞學研究領域的科學家,致力于創新和研發各類蛋白組學和細胞學相關的科研試劑,以期成為生命科學研究發展、藥物研發等領域的關鍵推動者。蛋白組學產品涵蓋從樣本制備(蛋白提取,純化,偶聯),蛋白定量到用于蛋白檢測的抗體和試劑盒;細胞學產品包含用于細胞培養的細胞因子,細胞狀態檢測、染色,細胞器提取,細胞代謝及細胞病理等試劑(盒)。Abbkine依靠產品組合以及獨特的市場營銷支持為主要的市場策略和產品創新模式,只為助力您的研究事業!

 

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