AgriseraECL SuperBright(10毫升試用裝)用戶說明

用于Western印跡檢測的AgriseraECL SuperBright是一種高質量的底物,用于在極低的femtogram水平下檢測辣根過氧化物酶活性,提供低背景和優異的信噪比。它是一個即用即用的雙部件系統,具有低背景、卓越的信噪比和最高的靈敏度。

 

作為Agrisera全國總代理,艾美捷科技強烈推薦Agrisera熱銷產品AgriseraECL SuperBright(10毫升試用裝)。產品僅用于科研,不可用于臨床診斷。

產品名稱 貨號 詳情
AgriseraECL SuperBright(10毫升試用裝) AS16-ECL-S-10 查看

 

AgriseraECL SuperBright(10毫升試用裝)用戶說明:

  • 將試劑A和B儲存在4-8°C的黑暗中。
  • 在一個干凈的容器中混合等體積的試劑A和B(化學發光基質),并在使用前30分鐘平衡至室溫。
  • 在加入化學發光基質之前,用方案中使用的緩沖液(PBS或TBS或TBST-T)清洗,制備膜。這將允許在襯底接觸之前去除任何背景。
  • 可以在襯底接觸后20分鐘內獲得最佳的可視化效果。通常情況下,培養2-5個是最佳的。
  • 用濾紙去除多余的基質。
  • 用透明塑料薄膜或片材保護器覆蓋印跡,并用x射線膠片或CCD相機曝光。
  • 在某些情況下,吐溫可以使反應猝滅。
  • 為了獲得最佳效果,必須使用干凈的容器和高質量的水。
  • 本產品的HS代碼為:3822.00.0002。
  • 儲存溫度:為2°C至8°C?;旌瞎ぷ髟噭┰谑覝鼗?°C下可穩定數天。特殊的批次一致性。

在2°C至8°C的黑暗中儲存時,保質期為24個月。保持容器密閉。儲存時應遠離熱源或光線。

 

AgriseraECL SuperBright(10毫升試用裝)應用示例:

AgriseraECL SuperBright(10毫升試用裝)

用蛋白質提取緩沖液PEB(AS08 300)提取來自擬南芥葉(1)、大麥葉(2)的10μg總蛋白質。用補充有50mM DTT的1X樣品緩沖液(NuPAGE LDS樣品緩沖液,Invitrogen)稀釋樣品,并在70°C下加熱5分鐘,并在加載前保持在冰上。將蛋白質樣品在4-12%Bolt Plus凝膠、LDS-PAGE上分離,并使用罐式轉移將其吸附到PVDF上70分鐘。轉移到溶于20mM Tris、137mM氯化鈉(pH 7.6)和0.1%(v/v)Tween-20(TBS-T)的5%脫脂乳中后,在室溫下攪拌1小時,立即阻斷印跡。將印跡在稀釋度為1:20000的Agrisera抗RbcL一級抗體(AS03 037)中孵育。

傾析抗體溶液并短暫漂洗印跡兩次,然后在室溫下用TBS-T在攪拌下洗滌1x15分鐘和3x5分鐘。將印跡在稀釋至1:20000的第二抗體(山羊抗兔IgG馬蘿卜過氧化物酶綴合物,推薦的第二抗AS09 602,Agrisera)中孵育,隨后洗滌并使用Agrisera ECL SuperBright檢測試劑進行檢測。使用CCD成像器(VersaDoc MP 4000)和Quantity One軟件(Bio-Rad)獲得印跡的圖像。暴露時間為60秒。

注:在大麥樣品中,觀察到特征良好的44kDa降解產物(Kokobun等人,2002)。

注意:

不要在試劑溶液中添加任何蛋白質或HRP酶。

可選:用去離子水中的0.2M磷酸二氫鈉溶液清洗試管、微量滴定板或膜。(初始pH值可能約為9)。緩慢加入0.2M的磷酸鈉一堿式水溶液,將pH降至8.4。

 

Agrisera 公司提供的植物領域的抗體涵蓋擬南芥、萊茵衣藻、藍藻、松柏類、硅藻、大豆、大麥、蒺藜苜蓿、煙草、稻、菜豆、小立碗蘚、楊樹、豌豆、番茄、馬鈴薯、菠菜、小麥、玉米、葡萄等多個物種,此外還有水生生物類(藻類、魚)抗體,細菌、昆蟲、真菌抗體。Agrisera 公司以提供高品質、優服務在歐洲樹立了優秀的品牌形象,并成為瑞典 Umeå Plant Science Centre的抗體供貨商,同時還積極拓展全球市場,每年都有大批采用該公司抗體產品的高質量研究論文發表于各類學術刊物,受到全球科研工作者的一致認可。作為Agrisera在中國的區域總代理,艾美捷科技有限公司將為中國客戶提供全面的Agrisera產品以及客戶訂制化服務。

 

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