為什么細胞培養基有如此眾多的命名方式?1640和DMEM這兩種常見培養基有何區別?另外,我們還將討論培養基的儲存方法。
01 為什么細胞培養基有如此眾多的命名方式?
培養基有很多不同的名字是因為根據不同細胞的培養和應用場景,培養基可以分為多種類型,最常見的是DMEM、RPMI-1640、MEM等。
這些培養基有自己的配方特點和適用范圍。例如,DMEM適用于哺乳動物細胞的培養,而RPMI-1640則適用于淋巴細胞的培養。
此外,還有一些專門用于特定類型細胞培養的培養基,如神經元培養基、肌肉細胞培養基等。
培養基是直接購買還是自己配制比較合適呢?我的建議是:常規的細胞培養直接采購商品化的培養基使用。
商品化的培養基通常以即用型的液體形式或粉劑形式提供。
這種培養基通常用于常見的細胞培養實驗中,只要按照合適比例加入血清,就成為了完全培養基,就可以應用于細胞的日常培養、細胞增殖、細胞分化、細胞凋亡等實驗中。
剛才提到的DMEM、RPMI-1640、MEM等培養基經常是以這種即用型的液體或粉劑形式提供給實驗操作者的。
此外,除了這些特定配方的即用型培養基意外,還有定制型的培養基,它是指需要根據特定的配方和比例來自行配制的培養基。
這種培養基通常用于一些特殊的細胞培養實驗中,如原代細胞培養、干細胞培養等。需要配制的培養基通常包括無血清培養基、低血清培養基、添加了特殊因子的培養基等。
這些就需要根據各自的特殊項目而制定針對性的培養條件了。
02 1640和DMEM這兩種常見培養基有何區別?
下面我們以實驗室最常見的DMEM和RPMI-1640為例,來介紹它們之間的不同之處。
DMEM(Dulbecco's Modified Eagle's Medium)是一種最廣泛應用的細胞培養基之一,它是由Eagle于1959年開發出來的,后由Dulbecco進行了改良。
DMEM主要適用于肝臟、腎臟、肺、心臟等多種類型的哺乳動物細胞系的培養。DMEM中含有較高濃度的葡萄糖(4500mg/L)、氨基酸、維生素和微量元素等營養物質。
此外,DMEM還添加了丙酮酸和乳酸等緩沖劑,能夠保持細胞在較寬的pH范圍內正常生長。
RPMI-1640(Roswell Park Memorial Institute medium 1640)是一種由Roswell Park紀念研究所開發的細胞培養基,適用于淋巴細胞、骨髓細胞、白血病細胞等多種類型的哺乳動物細胞系的培養。
RPMI-1640中含有較低濃度的葡萄糖(2000mg/L)、氨基酸、維生素和微量元素等營養物質。
此外,RPMI-1640還添加了緩沖劑HEPES和碳酸氫鹽,能夠保持細胞在較窄的pH范圍內正常生長。
DMEM和RPMI-1640在營養成分和緩沖劑的配比上有所不同,上述提到它們各自適合培養的細胞種類是經過大量實驗驗證得到的結果,建議同學們遵照執行即可。
但這也并不代表用錯了培養基細胞就一定會死掉,因為DMEM和1640只是在少數成分上做了針對優化,對于大部分細胞株,即使用錯,也只是不那么合適而已。
03 購買回來的培養基儲存方法?
培養基是一種含有大量營養物質的復雜溶液,其成分非常容易受到環境的影響而發生變化。因此,在儲存和使用培養基時需要注意以下幾點:
- 溫度:有條件的情況下,培養基應該儲存在4℃冰箱中,避免暴露在高溫環境中。此外,在使用前需要將培養基恢復到室溫。
- 光照:培養基應該避免暴露在陽光下或強烈的熒光燈下,以免造成成分變化。
- 消毒:在使用前需要對培養基進行消毒處理,以避免細菌和病毒污染。
- 儲存時間:一般來說,開封后的培養基應該在一個月內使用完畢,以避免成分變化造成影響。